寡多糖分子量是研究寡多糖一項重要的性質。同時,寡多糖的性質也與分子量密切相關。其分子量與小分子化合物的定義不同。寡多糖分子量是不同分子量同系物的混合體系的平均值,有個分布范圍。
相對分子質量的測定方法:滲透壓法、光散射法、凝膠電泳法、凝膠滲透色譜法、粘度法等。由于凝膠滲透色譜法(GPC)具有快速、操作簡單、分辨率高、重現(xiàn)性好的優(yōu)點。
博睿糖生物采用三種方法測定寡多糖分子量分布:
1)高效凝膠滲透色譜法(HPGPC):該方法采用HPGPC配合多根串聯(lián)凝膠柱,采用RI檢測器,對流出組分的不同出峰時間進行標定,并對照10種標準品制備的標曲,可同時得到Mw,Mp,Mn數(shù)據,并可以計算出聚合度情況。其中Mw為重均分子量,常用該值來表示多糖的分子量。Mw/Mn為分子量分布的指標,一般根據Mw/Mn比值,可以檢驗樣品的分子量分布是否均勻。該方法為經典、常用的多糖分子量測定方法之一。該方法同時可以作為多糖純度的鑒定標準,為多糖進一步進行甲基化、核磁解析提供基礎指導。
針對水可溶性多糖或水不溶性多糖均能夠進行分子量測定。
2)多角度激光光散射儀:該方法采用博睿糖生物新進儀器懷雅特多角度激光光散射儀DAWN與GPC-RI聯(lián)用,可同時得到多糖的分子量分布、分子粒徑和分子聚集態(tài)等。給客戶提供數(shù)據支持和參考。
3)粘度法:采用博睿糖生物新進的流變儀(TA),開發(fā)出一套估測多糖分子量的方法。
送樣說明:
送樣需選擇可溶或不溶性多糖;
需要樣品量5-10mg的凍干粉。